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第一试剂与样品混合时，聚阴离子与低密度脂蛋白形成复合物而遮蔽低密度脂蛋白胆固醇，试剂中的高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白与试剂1中的表面活性剂Ⅰ作用形成胶粒胆固醇，胶粒胆固醇在胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用下，生成过氧化氢，双氧水（H₂O₂）在过氧化物酶催化下与4-氨基安替比林反应生成无色产物。加入第二试剂后，表面活性剂Ⅱ与剩余的低密度脂蛋白反应生成胶粒胆固醇，在胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用下生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶催化下与4-氨基安替比林、色原反应生成红紫色产物。生成颜色的深浅与低密度脂蛋白胆固醇浓度成正比。